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    研域共享:關(guān)于生物試劑的洗刷方法

    發(fā)布時(shí)間: 2020-04-28  點(diǎn)擊次數(shù): 1613次

    洗刷是實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)程中看似很簡(jiǎn)單但又至關(guān)重要的一個(gè)進(jìn)程,所以今日我司給一些建議和輔導(dǎo)來(lái)給你們廣泛一下生物試劑這方面小常識(shí)。一同來(lái)看看吧!


    1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔參與洗刷液350μl,注入與吸出距離60秒。洗板5次。
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    2. 手藝洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗刷液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。


    生物試劑實(shí)驗(yàn)初步前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品制造時(shí),均需充沛混勻,并盡量避免起泡。


    1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,留意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,悄然晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)運(yùn)用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。


    2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中參與Detection Ab工作液 100μl(在運(yùn)用前15分鐘內(nèi)制造),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。


    3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。


    4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)制造)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。


    5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同進(jìn)程3。


    6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)踐顯況酌情縮短或延伸,但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔呈現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可中止)。


    7.每孔加中止液50μl,中止反響,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)。中止液的參與次第應(yīng)盡量與底物液的參與次第相同。


    8.生物試劑立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)丈量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提早翻開(kāi)酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。


    9.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將未用完的試劑按規(guī)則的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

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