99久久久无码国产精品6,朝鲜少妇xxxx做受,欧美三级在线播放,国产女人乱人伦精品一区二区

您好,歡迎進(jìn)入研域(上海)化學(xué)試劑有限公司網(wǎng)站!
一鍵分享網(wǎng)站到:
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 研域百科:神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)

    研域百科:神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)

    發(fā)布時(shí)間: 2019-06-27  點(diǎn)擊次數(shù): 1293次

    因?yàn)樯窠?jīng)干細(xì)胞(Neural Stem Cell)具有自我更新和多向分化的潛能,因而,可以選用懸浮神經(jīng)球培養(yǎng)的方法來(lái)獲得和研討。即將胚胎腦組織處理成單個(gè)細(xì)胞后,只有具有自我更新才能的細(xì)胞才能在培養(yǎng)液中克隆增殖成為懸浮的神經(jīng)球,并隨著傳代的進(jìn)行,堅(jiān)持增殖才能和向多種神經(jīng)子代細(xì)胞分化的才能。

    一、  神經(jīng)干細(xì)胞的分別和傳代

    無(wú)菌條件下取重生SD大鼠(出世48h內(nèi))腦組織,D-Hanks液充分漂洗后,在解剖顯微鏡下剝離腦膜,準(zhǔn)確分別海馬,用眼科剪將海馬剪碎后,再轉(zhuǎn)移到DMEM/F12(1:1)加B27 和bFGF(20ng/ml)的無(wú)血清培養(yǎng)基,吸管吹打機(jī)械分別制造單細(xì)胞懸液,臺(tái)盼藍(lán)染色后細(xì)胞計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞濃度為5×104~5個(gè)/ml,置于24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng),每孔參加細(xì)胞懸液500μl。待神經(jīng)球構(gòu)成后再次機(jī)械分別克隆制造單細(xì)胞懸液,仍以5×104個(gè)/ml的細(xì)胞濃度置于24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng),每孔參加細(xì)胞懸液500μl。爾后每7d機(jī)械分別克隆傳代1次,方法同前。
     
    二、BrdU符號(hào)

    將BrdU溶于無(wú)血清培養(yǎng)基,過(guò)濾除菌后參加神經(jīng)球構(gòu)成后再次機(jī)械分別克隆制造的單細(xì)胞懸液中(BrdU終濃度為5μmol/L),培養(yǎng)7d待新的神經(jīng)球構(gòu)成后,將神經(jīng)球轉(zhuǎn)移到預(yù)先涂布有多聚賴氨酸的培養(yǎng)板中,貼壁2h行BrdU免疫細(xì)胞化學(xué)染色。
     
    三、  神經(jīng)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化

    選取部分上述傳代后構(gòu)成的次代神經(jīng)球栽培于預(yù)先涂布有多聚賴氨酸的24孔培養(yǎng)板中,并參加有血清培養(yǎng)基(含10%胎牛血清的DMEM/F12),一部分神經(jīng)球于貼壁2h后行Nestin免疫細(xì)胞化學(xué)染色,另一部分神經(jīng)球持續(xù)培養(yǎng),調(diào)查其生長(zhǎng)分化情況。另將一部分次代神經(jīng)球機(jī)械分別制成單細(xì)胞懸液后參加有血清培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng),7d后分別行Tuj1 、GFAP 、Galc 免疫細(xì)胞化學(xué)染色。
     
    四、  條件培養(yǎng)液的制備

    取1g雞胚的后肢骨骼肌組織,參加9mlD-Hanks液中冰浴勻漿15min,離心獲得上清液,過(guò)濾除菌后,加兩倍體積DMEM/F12培養(yǎng)基制成條件培養(yǎng)液備用。
     
    五、  神經(jīng)干細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化

    將一部分次代神經(jīng)球機(jī)械分別制成單細(xì)胞懸液后分別參加條件培養(yǎng)液和有血清培養(yǎng)基(含10%胎牛血清的DMEM/F12)中對(duì)照貼壁培養(yǎng),7d后均行ChAT免疫細(xì)胞化學(xué)染色。

產(chǎn)品中心 Products
在線客服 聯(lián)系方式

服務(wù)熱線

021-54479081
021-54461587

最美情侣免费视频播放在线看 | 亚洲日韩精品无码av海量| 国产欧美精品区一区二区三区| 无码粉嫩小泬无套在线观看| 最近中文字幕高清中文字幕2018| 亚洲精品国产电影| 久久av高潮av无码av| 欧美在线 | 亚洲| 久久久婷婷成人综合激情| 亚洲人成色777777在线观看| 人妻无码中文专区久久五月婷| 18禁无遮挡无码网站免费| 麻豆熟妇人妻XXXXXX| 久久精品丝袜高跟鞋| 少妇aaa级久久久无码精品片| 丰满岳乱妇BD在线观看中字| 白嫩少妇激情无码| 日韩国产精品无码一区二区三区 | 欧美熟妇另类久久久久久多毛 | 青青河边草免费视频观看| 精品亚洲成a人片在线观看| 人妻少妇精品无码专区二区 | 国产9 9在线 | 中文| 人人妻人人澡人人爽精品欧美| 亚洲熟妇无码八AV在线播放| 国模无码一区二区三区| 日本无翼乌邪恶大全彩h| 人人妻人人玩人人澡人人爽| 成人毛片18女人毛片免费| 亚洲AV自慰白浆喷水网站少妇| 欧美疯狂XXXXBBBB喷潮| 欧美成人精品a片免费一区99| 亚洲精品成人片在线观看| 日本强好片久久久久久AAA| 国产真实乱人偷精品视频免费| 亚洲AV无码国产一区二区三区 | 狠狠躁天天躁无码中文字幕图| 国产午夜福利视频在线观看| 精精国产xxxx视频在线| 欧美熟妇另类久久久久久多毛 | 日本特黄特色aaa大片免费|